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病理组织石蜡切片染色是临床诊断的重要辅助手段,.石蜡切片不易脱片,染色后可被长期保存,使得石蜡切片同患者病历一样,可被长期封存,对预防医疗事故的发生有一定作用,故被各大医院广泛应用.常规病理切片的制作步骤中有许多注意事项.本文主要从组织固定取材、脱水包埋、切片、漂片等过程,介绍病理石蜡切片制作过程中易出现的问题和解决办法,以期进一步改善常规病理切片的制作,提高病理切片质量.
临床所取标本要新鲜,否则细胞内溶酶体会破裂,造成细胞自溶.组织固定液多选用10%中性福尔马林,其有效成分为甲醛,甲醛易挥发,使得福尔马林的效用会越来越低,所以福尔马林最好现配现用;固定液体积要超过标本的10~20倍,否则固定不充分,影响染色;固定标本的容器要以使标本不变形为宜;取材时,除严格按照病理标本取材操作规范外,小标本一般全取,大标本在去除不必要的组织后,要特别注意病变部位与正常组织交界处;取材切片观察面要平整,否则组织经脱水后变韧,导致组织包埋时不能压平于包埋盒中,切片时修整蜡块很繁琐.
现组织多采用程序化脱水浸蜡,所以要根据标本的多少及大小及时更换脱水机内试剂,否则会影响脱水效果,使组织与蜡不能相溶,无法制作出合格的组织蜡块.条件允许的情况下可根据组织标本的不同选择合适的石蜡,组织韧性大选择高熔点石蜡,组织软选取低熔点石蜡.包埋时,组织要充分压平于包埋模底部,以保证组织的预期观察切面在同一水平。
先向包埋盒中灌滴少许液体石蜡,此步骤可使成型蜡块底部光滑平整,再将组织观察面压平于包埋盒底部,组织摆放紧凑但不重叠.为使包埋组织的蜡块快速凝固,一般先将浸液体蜡的包埋盒置于冷冻台上,蜡块在置于冷冻台上后,应在蜡大部分或完全凝固后,再移动包埋盒;若蜡块未完全凝固,而移动了包埋盒,成型蜡块底部平整度相差甚远,有的凝固蜡块底部平整,有的蜡块底部不平整,可致小标本在修片的过程中被浪费.