动物染色体标本的实验方法步骤

    动物染色体标本的实验方法步骤。染色体是细胞内遗传物质的载体。骨髓细胞具有丰富的细胞质和高度的分裂能力，可直接观察到细胞周期中的各个时相。但通常情况下， 中期染色体在镜下的数量较少，如经秋水仙素处理后，分裂的骨髓细胞大多被阻断在有丝分裂中期，再经离心、低渗、固定、滴片等步骤，便可得到理想的染色体标本,用以观察中期染色体形态和染色体组型分析等实验。

1. 前处理 实验前3－4 小时，按每克体重3ug 剂量给蟾蜍的腹腔注射秋水仙素；

2. 取材 打开蟾蜍腹腔，截取1－2cm 长的一段小肠（以十二直肠为好），用见到剖开成片状，在生理盐水中洗净；

3. 低渗 将洗净的小肠投入到盛有5mL 低渗液的小试管中，在37℃水浴下处理30 分钟以上；

4. 固定 弃去低渗液，加入新配制的甲醇（3）：冰乙酸（1）固定液约5ml，静止固定40分钟左右；

5. 解离 弃去固定液，加入约2ml60％的冰乙酸，轻轻摇动，使解离的细胞充分散开，5 分钟后弃去小肠，即得细胞悬浮液；

6. 滴片 吸取少许细胞悬浮液，在适当的高度滴3－4 滴于冰冷的载片上，迅速吹斜气；

7. 干燥 滴片自然风干或吹风机吹干；

8. 染色 在载片上滴十滴磷酸缓冲液，再滴一滴Giemsa 染液，橡皮球轻轻吹均匀，染色30 分钟左右；

9. 观察 吹干后在显微镜下观察。

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