生物切片中冰冻切片制作步骤?
冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冰冻切片法,二氧化碳冰冻切片法,甲醇循环制冷冰冻切片法等。生物切片中冰冻切片制作步骤?你了解吗?
1.取材:组织尽可能新鲜、骤冷愈快愈好,才能避免冰晶。而冰晶会对细胞产生无法弥补的破坏,直接影响免疫组化结果。所以,一般采用把组织悬于液氮临界面上10-20秒后将组织投入液氮中骤冷。
2.恒冷箱温度
一般在冷冻后10分钟,到接近冷室温度时再切,一般组织在-15~-20℃切片易成功。每种组织有其合适的切片温度、刀的温度和冷室温度。
3.切片
由于生物切片冰冻切片的组织新鲜及骤冷包埋在OCT中,其实组织本身没有渗透入包埋剂,所以组织本身还是比较软的。这就对切片的技术要求比较高了,要求刀片锋利,刀口角度良好,组织温度与单片温度与箱体温度差合适;要求切片时进刀速度和力度都要把握好才能切出一张令人满意的片子的。而抗卷板的前缘与刀面须有足够的距离,使切片平滑通过。抗卷板略高于刀面的高点,得可凭经验调整刀对组织的角度。